1)光路:
a)★高效光路设计,能够以宽场成像速度实现共聚焦高通量成像:
b)采用高强度固态光源做激发光源;
c)采用的排布针孔阵列,应能降低针孔密度并提高激发光透过率;
d)采用转盘增透技术,应能够同时提高激发和发射荧光的透过率。
e)配置高灵敏度高量子效率检测器,应能够敏锐捕捉共聚焦荧光;
f)★可实现宽场成像、转盘共聚焦成像两种模式,两种模式能一键切换,同时满足高品质发表级共聚焦图像质量和宽场成像的速度。
2)★成像模式至少有:宽场成像模式,要求可适用于各种样品;高兼容性共聚焦模式,采用60μm针孔转盘共聚焦成像,应能支持活细胞长时间拍摄;
3)具有混合共聚焦模式,能够同时实现宽场实时反卷积共聚焦,和反卷积共聚焦加硬件共聚焦混合双共聚焦成像。反卷积共聚焦可连续调节,改变光学切片的厚度的同时,不损失荧光信号。
4)具有自动Z轴光切厚度匹配算法,能够根据光路参数自动计算和匹配最佳的Z轴光切厚度。
5)具有灵活的共聚焦成像功能,能够同时自动获得Z序列图像和Z轴叠加图像,无需后期手动生成Z轴叠加图像。支持多种Z轴自动叠加方式,至少包括景深扩展、最大亮度、最小亮度以及亮度叠加算法。
6)物镜:
a)★总体物镜要求:采用高级消色差物镜,提供2×、4×、10×、20×、40×、60×、100× 各种数值孔径及工作距离的7种规格物镜。
b)4×物镜是平场复消色差共聚焦专用物镜
c)10×物镜是共聚焦专用复消色差10×物镜,NA≥ 0.45
d)20×物镜是用于相差成像的专用相差20×平场半复消色差超长工作距离物镜
e)40×物镜是平场半复消色差超长工作距离物镜
f)★100×物镜是平场校正长工作距离物镜,NA≥0.85
7)物镜转换采用线性方式,用户可方便的进行自行更换。
8)光源:长寿命固态光引擎,寿命≥10,000小时,光强度不少于100mw, 开关速度≤10 us,光强度至少100级连续可调。
9)★聚焦方式:至少有精确图像自动对焦和高速激光自动聚焦两种聚焦方式,两种聚焦方式兼容任意多/微孔板,能够实现圆底孔板的精确高速对焦,可根据实验需求在任意板内/孔内/视野内单独使用或同时使用。
a)激光自动聚焦采用690nm激光,可自动检测板底厚度及偏差,速度快,无光漂白及光毒性;
b)图像自动聚焦方式,软件可通过优化算法(标准法和低信号法)自动计算找到最佳成像焦平面,避免因样品板厚度偏差及样品制备带来的失焦问题。
10)★高精度XY载物台及Z轴:采用高速负反馈磁悬浮XY载物台及Z轴,最小步进 ≤ 25nm,重复精度 ≤ 125nm。
11)★样品适用性:能够对各种标本,各种规格和任意底壁的符合或不符合SBS标准的6-1536 多孔板,包括Transwell孔板,圆底多孔板等进行自动成像且能对玻片、细胞芯片,组织阵列,35mm圆形培养皿等用户自制样品通过低倍镜预览后,自定义样品规格,在通过高倍镜进行高通量自动成像和数据分析。
12)8位置自动发射滤光片转轮,配备共聚焦系统专用CY5、DAPI、FITC、CY3和TexasRed滤片。
13)成像系统:采用科研级CMOS获得至少16bit的图像,不小于420万像素,像素规格不小于2048×2048 pixel,像素大小不小于6.5×6.5 um,最大满幅读出速率不低于50fps,读出噪声 ≤1.1e- ,量子效率 ≥ 72%。动态范围≥33,000:1。
14)大视野成像,10×物镜下成像面积≥1.4 mm×1.4 mm(1.96mm2)。且在物镜倍数不变的情况下,视野范围可调。
15)★配置透射光/相差成像模块,采用专用相差物镜,可对无荧光标记的细胞进行观察及分析。要求其相差成像模块能获得高对比度的无标记图像,且光源组件中具有相应聚光镜及相差环板支持相差成像。
16)★配置细胞培养环境控制模块,可同时实现温度、湿度和气体控制。活细胞培养室采用与成像系统隔离,且可同时实时成像的设计。可以防霉、防潮、防溅出,并可保护成像系统组件;可控制适合活细胞生长的温度(30–40°C ± 0.5°C)、 湿度控制(96孔板或384孔板0.5 μL/well/hour)及二氧化碳浓度(预混)等条件,活细胞实时观察可达7天以上。
17)具有多视野无缝拼接,及背景矫正功能。
18)所有硬件均可通过软件自动化控制。
3.3图像分析及处理系统参数:
1)具有专业数据管理系统软件,能够进行图像数据的存储和管理,方便用户管理和调用图像和测量数据,并能进行数据的备份和存档。
2)提供至少19个成熟分析模块(血管生成,细胞周期,细胞健康,高通量优化的细胞增殖,细胞分类和多波长细胞分类,细胞计数,颗粒度分析,细胞死活,微核,有丝分裂,单级纺锤体分析,神经生长,受体内吞,高通量优化的受体内吞分析,转位分析,增强型转为分析,多波长转位分析和核转位分析),客户自定义模块,3D分析,用于自定义模块编辑器的曲线拟合和峰值Pro分析算法以及透射光分割。
3)★图像分系软件带有模块化分析及用户自定义编辑器功能。
4)★具有journal 功能能够针对用户不同的实验要求扩展相应功能,方便用户编写适合于自身实验方法的独特分析模块。
5)图像处理功能:能够进行图像平滑、背景扣除、自适应阈值化